معلومة

5F. التعرف على جهاز المناعة - علم الأحياء

5F. التعرف على جهاز المناعة - علم الأحياء


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

في هذا الفصل الأخير حول الارتباط ، سننظر في المهمة الشاقة التي يواجهها الجهاز المناعي - التعرف على جميع الجزيئات "الأجنبية" الممكنة والرد عليها ، إما عن طريق استهدافها للتخلص منها ، أو للمفارقة ، التعرف عليها ولكن ليس الرد عليها. لهم (عملية تسمى التسامح). يمكن قول الشيء نفسه عن "جزيئات الذات". يجب أن يتعرف عليها جهاز المناعة ولكن لا يستجيب لها ، وإلا فقد تنشأ أمراض المناعة الذاتية التي يستهدف فيها الجهاز المناعي القوي في الجسم نفسه.


الحدود في علم المناعة

انتماءات المحرر والمراجعين هي الأحدث التي يتم توفيرها في ملفات تعريف بحث Loop وقد لا تعكس موقفهم في وقت المراجعة.



مشاركه فى

خيارات الوصول

احصل على حق الوصول الكامل إلى دفتر اليومية لمدة عام واحد

جميع الأسعار أسعار صافي.
سيتم إضافة ضريبة القيمة المضافة في وقت لاحق عند الخروج.
سيتم الانتهاء من حساب الضريبة أثناء الخروج.

احصل على وصول محدود أو كامل للمقالات على ReadCube.

جميع الأسعار أسعار صافي.


ملخص المؤلف

لقد ثبت سابقًا أن تنشيط الجسيم الملتهب يمكن أن يحدث أثناء العدوى الفيروسية لإنتاج السيتوكينات النشطة IL-1β و IL-18. تمثل دراستنا تقدمًا كبيرًا ، حيث نظهر الآن أنه في الواقع توجد مجمعات التهاب NLR مميزة وروابط فيروسية لإفراز IL-1β (Vpu) مقارنة بإفراز IL-18 (gp41) استجابة لفيروس HIV-1.

الأهم من ذلك ، نظهر أن بروتين مغلف فيروس نقص المناعة البشرية gp41 يمثل أول يجند غير بكتيري لتجميع NAIP / NLRC4 الالتهاب. فيروس نقص المناعة البشرية gp41 هو فيروبورين ، وبالتالي توضح بياناتنا لأول مرة أن الجسيم الملتهب NAIP / NLRC4 يتجمع لجميع البروتينات المكونة للمسام ، بغض النظر عما إذا كان لها أصل فيروسي أو بكتيري. هذا أمر بالغ الأهمية للاستجابة المضادة للفيروسات المضيفة ولها آثار واسعة على المناعة الفطرية بشكل عام.

الاقتباس: Triantafilou K و Ward CJK و Czubala M و Ferris RG و Koppe E و Haffner C وآخرون. (2021) التعرف التفاضلي على إفراز IL-1β و IL-18 المحفز بفيروس نقص المناعة البشرية من خلال إشارات NLR و NAIP في الضامة المشتقة من الخلية الوحيدة. بلوس باثوج 17 (4): e1009417. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1009417

محرر: تشارلز آر إم بانغهام ، إمبريال كوليدج لندن ، المملكة المتحدة

تم الاستلام: 30 يونيو 2020 وافقت: 22 فبراير 2021 نشرت: 16 أبريل 2021

حقوق النشر: © 2021 تريانتافيلو وآخرون. هذا مقال مفتوح الوصول يتم توزيعه بموجب شروط ترخيص Creative Commons Attribution License ، والذي يسمح بالاستخدام غير المقيد والتوزيع والاستنساخ في أي وسيط ، بشرط ذكر المؤلف والمصدر الأصليين.

توافر البيانات: جميع البيانات ذات الصلة موجودة داخل المخطوطة وملفات المعلومات الداعمة الخاصة بها.

التمويل: تم دعم هذا العمل من قبل برنامج GlaxoSmithKline Immunology Catalyst. لم يكن للممولين دور في تصميم الدراسة أو جمع البيانات وتحليلها أو اتخاذ قرار النشر أو إعداد المخطوطة.

تضارب المصالح: وقد أعلن الباحثون إلى أن لا المصالح المتنافسة موجودة.


شكر وتقدير

نشكر P. Wehler و A. Seegebarth و U. Uhlig على المساعدة الفنية لـ DRFZ FCCF لفرز الخلايا D. Hernandez لقراءة نقدية للمخطوطة A. Moretta (جامعة جنوة) لاستنساخ الأجسام المضادة GL183 E. Weiss (جامعة Ludwig Maximilian) ) لخلايا K562 – HLA-E J. Coligan (المعاهد الوطنية الأمريكية للصحة) لخلايا RMA-S-HLA-E G. سميث (جامعة نورث وسترن) للبلازميد pGS403 و A. Scheffold و A. ج. Malmberg للتعليقات أثناء إعداد المخطوطة. بدعم من Leibniz Science Campus ، الالتهاب المزمن (http://www.chronische-entzuendung.org) ، برنامج Leibniz Best Minds (KT) ، مؤسسة الأبحاث الألمانية (SFB 650 ، RO3565 / 2-1 و RO3565 / 4-1 إلى CR) SFB900 إلى MM و IP و CK وبرنامج Heisenberg RO 3565 / 1-1 لـ CR) ، ولاية برلين (لأعمال FH و M.-FM) ، ومؤسسة Stiftung Charité (لـ I.-KN) ، والاتحاد الأوروبي صندوق التنمية الإقليمية (ERDF 2014-2020 و EFRE 1.8 / 11 لعمل FH و M.-FM) ومدرسة Leibniz العليا لأمراض الروماتيزم (QH).

تضارب المصالح

الكتاب يعلن لا تضارب المصالح.


المواد والأساليب

الكواشف

Zymosan (سيجما) و بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية (العزلة السريرية) كما هو موصوف سابقاً (Underhill وآخرون، 1999). Laminarin (قابل للذوبان β-glucan من لاميناريا ديجيتاتا، سيجما) ومنان (من S. cerevisiae، Sigma) كمخزون 10 مجم / مل في RPMI ، معقم تم ترشيحه وتخزينه مجمداً حتى الاستخدام. تم تحضير الكيتين (من قشرة السلطعون ، سيجما) بالمثل ، ولكن بدون ترشيح.

ثقافات الخميرة

G85 (نوع بري) و G30032 (cts1Δ) هي سلالات متساوية من S. cerevisiae S1278b وكانت الهدايا الكريمة للدكتور تيم جاليتسكي (معهد بيولوجيا الأنظمة). ال cts1 تم الحذف باستخدام إستراتيجية قائمة على PCR والتي تحل محل إطار القراءة المفتوح للجين (ORF) بواسطة أليل حذف "الباركود" KanMX4 (Winzeler وآخرون, 1999 ). C. البيض ("النوع البري" في هذه المخطوطة ، ATCC 90028) ، C. البيض (سلالة المختبر CAI4 ، النمط الجيني ura3∷1 imm434 / ura3∷1 imm434 ، هدية كريمة من دكتور جي فينك) ، C. الشلل (ATCC22019) ، C. pseudotropicalis (ATCC 40764) ، C. krusei (ATCC 6259) و S. cerevisiae تم الاحتفاظ بها كمخزون على لوحات YPD. لتحضير الخميرة الطازجة ، C. البيض تم زرع البذور في مرق Sabouraud سكر العنب (SDB) وحضنت مع الرج عند 37 درجة مئوية طوال الليل. لتحضير الشعيرات ، C. البيض تم زرعه في RPMI 1640 (Mediatech) وحضنت مع الاهتزاز عند 37 درجة مئوية طوال الليل. كانت الخلايا عادة و gt95٪ تعيش في وقت الاستخدام ، كما هو محدد بواسطة تلطيخ FUN-1 (المجسات الجزيئية) (Pina-Vaz وآخرون, 2001 ). S. cerevisiae نمت الخميرة طوال الليل في YPD عند 30 درجة مئوية. تم غسل مستنبتات الخميرة والخيوط ثلاث مرات على الأقل في برنامج تلفزيوني معقم قبل الاستخدام. بالنسبة للتجارب التي تتطلب تحفيز الضامة بالفطريات ، تم تكوير جزء من كل مزرعة ، وتجفيفها تحت تفريغ ، ووزنها لتحديد الوزن الجاف. استعدنا عادة 6 × 10 4 خميرة / ميكروغرام وزن جاف. تم استخدام قسامات من الثقافات الحية التي تمثل الأوزان الجافة المشار إليها من الخميرة أو الخيوط للتحفيز. لتحضير الخميرة المقتولة بالحرارة ، تم تحضين الكائنات الحية لمدة 20 دقيقة و 90 درجة مئوية. لتحضير C. البيض الخميرة ذات الندبات التي تحمل علامات الفلورسنت والولادة ، تم تحضين الخميرة لمدة 30 دقيقة في برنامج تلفزيوني مع 0.5 مجم / مل من راصات جرثومة القمح المسمى FITC (يكتين من Triticum vulgaris سيجما) (باول وآخرون، 2003). تم غسل الخميرة المصنفة مرة واحدة باستخدام PBS ، وتم تثبيتها قليلاً باستخدام 2.5٪ فورمالين في برنامج تلفزيوني لمدة 10 دقائق لمنع إزالة الليكتين ، وغسلها باستخدام برنامج تلفزيوني قبل الاستخدام.

زراعة الخلايا

تمت المحافظة على HEK 293 (ATCC # CRL-1573) و HEK 293T (ATCC # CRL-11268) في DMEM (Invitrogen) ، وتم الحفاظ على خط خلية بلعم الفأر RAW 264.7 (ATCC # TIB-71) في RPMI مع 25 مم HEPES (Invitrogen). تم تجهيز كلتا الوسيطتين بمصل بقري جنيني معطل بالحرارة بنسبة 10٪ (Hyclone) ، و 100 U / ml بنسلين ، و 100 ميكروغرام / مل من الستربتومايسين ، و 2 ملي مولار من الجلوتامين (Gibco). تم وصف توليد خلايا RAW 264.7 التي تعبر عن الفئران ذات العلامات V5 Dectin-1 سابقًا (Gantner وآخرون، 2003). تم إنشاء خلايا HEK293 التي تعبر عن Dectin-1 الموسوم بـ GFP بواسطة خلايا cotransfecting مع pTZ / GFP-Dectin-1 (ناقل تعبير عن مورين كامل الطول Dectin-1 مدمج في GFP عند الطرف الأميني تحت سيطرة مروج التتراسيكلين المنظم. ) و pTTIN ، وهو ناقل تعبير يوجه إنتاج ترميز mRNA ثنائي التكافؤ لمنشط النسخ المنظم للتتراسيكلين (Tak ، المشتق من pTetTak ، Invitrogen) ومقاومة النيوميسين تحت سيطرة مروج منظم التتراسيكلين. تم اختيار خطوط الخلايا المنقولة بشكل ثابت باستخدام نيومايسين (في حالة عدم وجود التتراسيكلين) واستنساخها. تم تحضير الضامة المشتقة من نخاع العظم من نخاع العظم التي تم جمعها من الفئران C57Bl / 6 (مختبرات جاكسون) ، والتي تم تربيتها لمدة 5 أيام في RPMI كاملة مكملة بـ 50 نانوغرام / مل مؤتلف بشري M-CSF (Chiron Corp.). بالنسبة لفحوصات التنشيط ، تم غسل الخلايا ومطليها طوال الليل في الوسائط باستخدام M-CSF والفأر المؤتلف IFN-(50 وحدة / مل) (PeproTech).

قابل للذوبان Dectin-1 وإنتاج الأجسام المضادة

تم استنساخ منطقة تشفير (كدنا) للمجال خارج الخلية C- الطرف من الفئران Dectin-1 (الأحماض الأمينية 69-244) في ناقل تعبير (pHA / Tet) يوفر ببتيد إشارة سلسلة Ig kappa amino-terminal وهماجلوتين (HA) ) علامة حلقية ، وكلها تحت سيطرة محفز منظم التتراسيكلين. تم نقل هذا المتجه بشكل عابر مع pTetTak (Invitrogen) ، وهو ناقل يشفر المنشط النسخي الذي ينظم التتراسيكلين للتعبير عن طريق المروج المحرض Tet ، إلى خلايا HEK293T باستخدام Polyfect (Qiagen) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. تم حصاد المواد الطافية للثقافة بعد يومين من ترنسفكأيشن ، وتركيزها أربعة أضعاف بالطرد المركزي من خلال مرشح قطع 5 كيلو دالتون ، وتخزينها عند -20 درجة مئوية. في بعض التجارب ، تمت معالجة البروتين الغليكوزيلاتي بـ PNGase F (New England Biolabs) وفقًا لتوصيات الشركة المصنعة. تسبب إزالة الجليكوزيل في تشغيل المستقبل كنطاق حاد واحد عن طريق تغيير طبيعة SDS – PAGE (البيانات غير معروضة).

تم أيضًا إنتاج المجال خارج الخلية للماوس Dectin-1 بالتعبير في الإشريكية القولونية. تم استنساخ منطقة الترميز للمجال خارج الخلية في pTrcHis2-TOPO (Invitrogen) ، وتم التعبير عنها وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. تمت تنقية أجسام الشمول المحتوية على البروتين ، وتم إذابة البروتين في ظروف تغيير طبيعة ، وتم إعادة طيه بواسطة غسيل الكلى (Steinle وآخرون، 2001). تم استخدام البروتين المعبر عنه بالبكتيريا لإنتاج مضاد أرنب متعدد النسيلة في R&R Rabbitry (ستانوود ، واشنطن). تم فحص مضادات الديكتين المضادة لتلطيخ محدد لخلايا HEK293 التي تعبر عن Dectin-1 ، وعن طريق طقطقة مناعية للبروتين المنتج في طاف الخلايا HEK293 أعلاه (البيانات غير معروضة).

قياس التدفق الخلوي والفحص المجهري باستخدام Dectin-1 القابل للذوبان

تم تحضين المواد الطافية للثقافة الخلوية HEK293 المنقولة أو المنقولة إلى sDectin على الجليد لمدة ساعة واحدة باستخدام جسم مضاد مقترن بـ FITC لعلامة حلقية HA (HA.11-FITC ، Covance) لتوليد ديكتين قابل للذوبان ذو علامات الفلورسنت يمكن تخزينه في −20 درجة مئوية حتى الاستخدام. يمكن أيضًا استخدام Dectin-1 غير القابل للذوبان غير الملصق لتلطيخ الجسيمات عندما يتبعها حضانة ثانية مع الجسم المضاد للعلامة الحلقية (البيانات غير معروضة). تم جمع جزيئات في 1 ميكرولتر من 10 ملغ / مل من زيموسان ، أو 5 ميكرولتر من ثقافة الخميرة الطازجة ، أو 30 ميكرولتر من ثقافة الشعيرة عن طريق الطرد المركزي ، وحضنت في 30 ميكرولتر من Dectin-1 القابل للذوبان المسمى FITC لمدة ساعة واحدة على الجليد. في بعض التجارب ، تم تحضين Dectin-1 القابل للذوبان المسمى FITC مسبقًا بمختلف الكربوهيدرات بالتركيزات المحددة لمدة 20 دقيقة قبل الاستخدام. في بعض التجارب ، كانت الخميرة ملطخة بالإضافة إلى ذلك باستخدام الكالسوفلور الأبيض (Fluostain I ، Sigma). في بعض التجارب ، تمت معالجة الخميرة مسبقًا ببروتيناز K (Sigma ، 2.5 U / ml) أو β-1،3- D -glucanase (Fluka ، 10 U / ml) في PBS لمدة ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية. كما هو مبين ، في بعض التجارب ، كانت الجزيئات ملطخة بـ Dectin-1 المعبر عنه بالبكتيريا الحيوية (10 ميكروغرام / مل) وتم اكتشاف تلطيخ باستخدام الستربتافيدين- FITC (Sigma). تم غسل الجسيمات بالطرد المركزي مرة واحدة باستخدام 1 مل من 10٪ من مصل العجل في PBS ، وتم تعليقها في 0.5 مل من PBS مع 2.5٪ من الفورمالين ، وتم تحليلها عن طريق قياس التدفق الخلوي على مقياس FACScaliber (BD Biosciences) باستخدام برنامج ™ CellQuest. بدلاً من ذلك ، تم تركيب الجسيمات المغسولة على شرائح زجاجية وفحصها باستخدام مجهر متحد البؤر (لايكا) SP2 المسح بالليزر (لايكا). تم جمع كل الصور المقارنة ومعالجتها بشكل متماثل. تم تلطيخ الضامة لنخاع العظام بمضادات أرنب لـ Dectin-1 باستخدام الطرق الموصوفة سابقًا (Underhill وآخرون، 1999). تم إجراء جميع تجارب التلوين ثلاث مرات على الأقل بنتائج مماثلة.

تشكلت شعيرات في الجسم الحي

لاستعادة الخيوط المتكونة في الجسم الحي، النوع البري C. البيض تم تحضين الخميرة في ماء معقم لمدة 4 ساعات عند 37 درجة مئوية. تم غسل الخميرة ثلاث مرات باستخدام برنامج تلفزيوني معقم. تم حقن C57Bl / 6 فئران داخل الصفاق مع 10 8 خميرة. بعد 24 ساعة من الحضانة ، قتلت الفئران و الكانديدا تم الحصول على خيوط من سطح الكلى عن طريق الكشط اللطيف. كانت ثقافة الخميرة الأصلية والخيوط المستعادة ملطخة بـ sDectin و calcofluor الأبيض وتم تصويرها بواسطة الفحص المجهري الفلوري ، كما هو موضح أعلاه.

مقايسة ربط sDectin المرتبط بالإنزيم

في الكل ، 50 ميكروغرام الكانديدا تم تحضين الخميرة أو الخيوط في مواد طافية HEK293 تحتوي على HA sDectin والجسم المضاد HA.11 (Covance) ، لمدة 30 دقيقة على الجليد ، إما في وجود أو عدم وجود laminarin عند 1 مجم / مل. تم تحضين عناصر التحكم في طاف HEK293 و HA.11 المصابة بنقل وهمي. الكانديدا تم تكويرها وغسلها في DMEM كامل ، متبوعًا بالحضانة في HRP الماعز المضاد للفأر (Jackson Immunoresearch) في DMEM الكامل لمدة 60 دقيقة على الجليد. الكانديدا تم تكويرها وغسلها في DMEM بالكامل ، وتم تعليقها في برنامج تلفزيوني. تم تجفيف الخميرة والخيوط المربوطة في صفيحة بها 96 بئر ، وحضنت مع 100 ميكرولتر من مادة بيروكسيديز TMB لحوالي 20 دقيقة ، وتوقف التفاعل بحمض الكبريتيك (سيغما). تم إجراء التقدير اللوني على مقياس الطيف الضوئي PowerWaveX باستخدام صفيحة ميكروسكوبية عند 450 نانومتر (أدوات Bio-Tek). اكتملت تجربة الربط ثلاث مرات بنتائج مماثلة.

المقايسات الوظيفية

تم جمع البيانات لجميع الفحوصات الوظيفية في ثلاث تجارب منفصلة على الأقل ، وتم عرض تجربة تمثيلية واحدة. بالنسبة لتجارب Dectin-1-blocking ، تم تحضين خلايا نخاع عظم الفأر مسبقًا باستخدام laminarin (1 مجم / مل) أو مصل الأرانب (10 ٪) عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة ، متبوعًا بتغيير جديد في الوسائط. بالنسبة لتجارب منع اللامينارين ، تم تضمين اللامينارين الطازج مع المنبهات. في بعض التجارب ، تم تحضير الخميرة المطلية بـ sDectin عن طريق احتضان الخميرة المغسولة مسبقًا بـ 400 ميكروغرام / مل من sDectin المعبر عنه بكتيريًا في PBS لمدة 30 دقيقة على الجليد. تم تقييم إنتاج ROS عن طريق التلألؤ الكيميائي المحسن باللومينول كما هو موصوف سابقًا (Gantner وآخرون، 2003). تم إجراء الترسيب المناعي للفوسفوتيروزين للديكتين -1 كما هو موصوف سابقًا (Gantner وآخرون, 2003 ).

تم إجراء بلعمة الخميرة عن طريق احتضان البلاعم المشتقة من نخاع العظم مع الكواشف المحددة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، ثم تغيير الوسائط إلى RPMI طازجة تحتوي على 50 ميكروغرام من النوع البري C. البيض الخميرة ، أو الخميرة التي تم تحضينها مسبقًا مع sDectin ، متبوعة بالطرد المركزي لفترة وجيزة لاستقرار الخميرة على البلاعم ، والاحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. تم بعد ذلك غسل الخلايا بقوة باستخدام برنامج تلفزيوني بارد ، ورفعها باستخدام برنامج تلفزيوني يحتوي على 5 ملي مولار EDTA و 1 ملي مولار أزيد الصوديوم. كانت الخلايا ملطخة بالكلسوفلور الأبيض للكشف عن الخميرة غير الداخلية ، وتركيبها وفحصها مجهريًا. تم تقييم مؤشر البلعمة عن طريق حساب عدد جزيئات الخميرة الداخلية لكل 100 خلية بلعمية.

لقياسات C. البيض البلعمة بواسطة خلايا HEK293 Dectin-1-معبرة ، 100 ميكرولتر بين عشية وضحاها C. البيض تم تكوير الخميرة المزروعة في SDB وتعليقها في 0.5 مل 2 ٪ جلوكوز ، 10 مم HEPES (درجة الحموضة 7.0) تحتوي على 10 ميكرومتر من الصبغة الحيوية ، FUN-1 (مجسات جزيئية). تم تحضين الخلايا لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة وغسلها عدة مرات في محلول جلوكوز. كانت الخلايا & gt90٪ قابلة للحياة. تم وضع ما مجموعه 200000 خلية في كل بئر من لوحة 24 بئر تحتوي على 293 خلية معبرة عن Dectin-1 ، واستقرت في القاع عن طريق الطرد المركزي لفترة وجيزة. تم السماح بالبلعمة بالمضي قدمًا لمدة 20 دقيقة عند 37 درجة مئوية قبل حصاد الخلايا ، وتم تجريد الخميرة خارج الخلية غير الداخلية من السطح بمعالجة بروتيناز K (50 ميكروغرام / مل ، 20 دقيقة) ، واستيعاب الخميرة الحية (FUN-1 ، أحمر قناة) عن طريق قياس التدفق الخلوي.

البيانات التكميلية

البيانات التكميلية متوفرة في مجلة EMBO متصل.


مناقشة

أظهرت الأدلة المتراكمة أن الجهاز المناعي الفطري يلعب دورًا مهمًا في الدفاع ضد الفيروسات في الثدييات وبعض الحشرات النموذجية مثل ذبابة الفاكهة والبعوض (1، 13 & # x201316). ومع ذلك ، ما إذا كان المسار الكنسي للحشرات الناقلة المشاركة أيضًا في الدفاع ضد فيروسات النبات يظل غير معروف. في هذه الدراسة ، وجدنا أن RSV ينشط مسار Toll المناعي لـ L. المخطط من خلال التفاعل المباشر بين بروتين Toll و RSV-NP. ضربة قاضية لـ رسوم زاد بشكل كبير من انتشار RSV في الحشرات الناقلة ، و dsرسوم- أظهرت الحشرات المعالجة معدل وفيات أعلى من دسGFP-المعاملة. أشارت نتائجنا إلى دور محتمل لمسار تول في تقييد عدوى فيروس النبات.

تنشيط المسارات المناعية يعتمد على مجموعة من PRRs للتعرف على PAMPs ، وبالتالي تحفيز استجابة المستجيب المناسب لإزالة العدوى (36). بالنسبة لمسار Toll ، تم إنجاز هذه العملية بشكل أساسي بواسطة Toll ، وهو مستقبل المنبع لهذا المسار. في ذبابة الفاكهة، Toll-7 هو PRR الذي تفاعل مع VSV في غشاء البلازما والالتهام الذاتي المضاد للفيروسات (2). في الجمبري ، تؤدي ضربة قاضية لـ Toll4 إلى ارتفاع الأحمال الفيروسية وتجعل الجمبري أكثر عرضة للإصابة بفيروس WSSV. علاوة على ذلك ، يمكن أن يعمل Toll4 بمثابة PRR المنبع للكشف عن WSSV ، ويؤدي إلى الانتقال النووي والفوسفور في الظهرية لتحفيز إنتاج AMP ضد الفيروس (16). حددت دراستنا تفاعلًا قويًا بين Toll و RSV-NP ، مما يشير إلى أن Toll in L. المخطط قد يكون أحد المستقبلات الأولية للتعرف على RSV ، وكان مسار Toll مرتبطًا بعدوى فيروس النبات في ناقلات الحشرات.

تعد مسارات التول هي المكون الرئيسي للمسارات المناعية للحشرات التي تنشط مجموعة من البروتينات المناعية استجابة لغزو الكائنات الحية الدقيقة المختلفة. تم الإبلاغ عن انتفاخ ملحوظ في جينات مسار تول في الزاعجة المصرية تحدى مع المتصورة جالينسيوم (37), ذبابة الفاكهة تحدى فيروس التهاب الفم الحويصلي (2) ، و Litopenaeus vannamei تحدى مع WSSV (16). أظهرت دراستنا ذلك رسوم, الة النفخ، و MyD88 استجابت بنشاط خلال المرحلة المبكرة من العدوى الفموية RSV (الشكل 4) ، وفقًا للعمل السابق. لعامل النسخ ظهري، إنه مستقر معبرًا عنه في المرحلة المبكرة من العدوى الفيروسية ، ولكنه منظم بشكل كبير في المرحلة المتأخرة (الشكل 4). حيث رسوم, الة النفخ, MyD88، و ظهري هي الجينات الأساسية الأربعة لمسار إشارات Toll-Dorsal الكنسي ، وتنظيم هذه الجينات الأربعة في مراحل مختلفة أثناء عدوى RSV (الشكل 4) ، والتفاعل بين Toll و RSV-NP (الشكل 2) ، وكذلك زيادة الفيروس التتر لوحظ في سرسوم-علاج الكواكب (الشكل 6) ، مما يعني أن هذا المسار الكلاسيكي كان متورطًا بنشاط في الاستجابة لعدوى RSV. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لمزيد من التحقيق في تفاصيل الاستجابة المضادة للفيروسات في اتجاه مجرى النهر ، مثل كيف ينتقل الظهري من السيتوبلازم إلى النواة ، وما هي المؤثرات النهائية التي يتم تنظيمها بواسطة الظهر الناجم عن عدوى RSV. بالإضافة إلى ذلك ، بالنسبة للخشب الفيروسي ، يمكن أن تؤوي الفيروسات لعدة أجيال ، ولا يمكن العثور على نمط ظاهري مهم في الحشرات المصابة بفيروس RSV. في هذه الدراسة ، من المثير للاهتمام أن نجد أن مستوى التعبير لأربعة جينات أساسية لمسار تول كان أعلى بشكل ملحوظ في مستنقع الفيروسات الفيروسي مقارنة بالمستوى غير الفيروسي (الشكل 3). التنشيط المستمر للمسار الدفاعي يستهلك حتمًا موارد إضافية ، مما يضر بالحشرات (38). افترضنا أنه قد يكون من الأهم بالنسبة للنباتات الحد من عدوى RSV من الأيضات الفسيولوجية الأخرى. ومن المثير للاهتمام ، أنه تم التعرف على معدل وفيات أعلى في dsرسوم- عولجت الكواكب الفيروسية (الشكل 6 ج) ، مما يشير إلى ذلك dsToll- قد يتداخل العلاج مع التوازن الدقيق الراسخ بين المناعة الفطرية للاصابة بالعدوى الفيروسية المزمنة وعدوى RSV المستمرة ، كما هو موصوف في البعوض (39). تتكون نتائجنا أيضًا من التقرير السابق الذي يفيد بأن فئران ضربة قاضية TLR4 أظهرت تضاعفًا فيروسيًا أكبر (فيروس اللقاح) ومعدل وفيات مقارنة بالفئران البرية بعد عدوى الجهاز التنفسي (40) ، مما يشير إلى أن مسار إشارات Toll للمضيف قد يكون ضروريًا للمضيف. عدوى الفيروس المستمرة.

تم توثيق مشاركة مسار Toll في تقييد الإصابة بالفيروس بشكل جيد في العمل السابق. في ذبابة الفاكهة, رسوم و فرق أظهرت خطوط متحولة زيادة القابلية للإصابة بـ ذبابة الفاكهة X فيروس (1) ، و رقم الهاتف 7 عزز استنفاد تكاثر فيروس التهاب الفم الحويصلي (2). في الجمبري ، إسكات رقم الهاتف 4 أدى إلى ارتفاع عيار WSSV ، مع متوسط ​​عبء الحمض النووي الفيروسي أعلى بحوالي 150 مرة من عنصر التحكم (16). في A. aegypti، إسكات MyD88 أدى إلى زيادة كبيرة في عيارات فيروس حمى الضنك ، مما يدل على أهمية هذا المسار المناعي الفطري في الدفاع ضد الأنماط المصلية لفيروس حمى الضنك في المراحل الأولى من الإصابة (13). أظهرت دراستنا ذلك رسوم-تثبيط و ظهري- أدى التثبيط إلى زيادة عيار RSV بشكل كبير ، مما يشير إلى الأدوار المحتملة المضادة للفيروسات لمسار Toll ضد فيروس النبات. ومع ذلك ، بالنسبة لـ dsMyD88- علاج الكواكب الفيروسية ، لم يلاحظ أي تغيير كبير في عيار RSV عند مقارنته بمجموعة التحكم (dsGFP) (الشكل 5F) ، والذي يتعارض مع الدراسات السابقة على البعوض (13) والفئران (41). النظر في زيادة التعبير عن MyD88 استجابةً لعدوى RSV (الشكل 4C) ، نفترض ذلك MyD88 قد تلعب أدوارًا أكثر أهمية أثناء عملية عدوى RSV ، بدلاً من الحفاظ على عدوى RSV المستمرة في القوارض. علاوة على ذلك ، بشكل غير متوقع ، عيار RSV في dsالة النفخ- انخفض العلاج بشكل ملحوظ مقارنة بمجموعة التحكم (dsGFP) (الشكل 5 د). سيكون من المثير للاهتمام مواصلة استكشاف إمكانية أن يتفاعل Tube بشكل مباشر مع بروتين RSV ويمكن أن يخطفه الفيروس لتعزيز انتشاره.


استنتاج

في الختام ، سهلت دراستنا فهم التفاعلات المناعية للـ lncRNA ووفرت مورداً قيماً من lncRNAs ذات الصلة بالمناعة في سرطان البروستاتا. يمكن أن تكون lncRNAs هذه مؤشرات حيوية محتملة للخلايا المناعية أو الأنشطة المتعلقة بالمناعة في سرطان البروستاتا. نظرًا لأن مناعة الورم لها تأثيرات كبيرة على تطور السرطان ، يمكن للعديد من lncRNAs ذات الصلة بالمناعة أن تتنبأ بالتشخيص والعلاج المناعي للسرطانات (Zhou et al. ، 2017 ، 2018 Sun J. et al. ، 2020 Zhou et al. ، 2020). لذلك ، يمكن استخدام lncRNAs للتنبؤ بل وتعديل أنشطة الخلايا المناعية أو وفرة نقاط التفتيش المناعية للاستفادة من العلاج المناعي لمرضى سرطان البروستاتا.


دعم المعلومات

S1 التين. التحقق من صحة الأجسام المضادة أحادية النسيلة HIRA (mAb).

تم نقل خلايا HFt بشكل ثابت للتعبير عن التحكم غير المستهدف (shCtrl) أو Daxx- (التحكم الثانوي shDaxx) أو استهداف HIRA (استنساخ shHIRA F2-F4) shRNAs. (أ) تحليل اللطخة الغربية لمستويات التعبير عن HIRA (مضاد HIRA mAb 04-1488 ، ميليبور) في محلولات الخلية الكاملة المشتقة من خلايا shCtrl أو shDaxx أو shHIRA. يتم عرض الأكتين والهيستون H3 كعناصر تحكم في التحميل. (ب) الكميات qRT-PCR من HIRA مستويات mRNA في خلايا shCtrl أو shDaxx أو shHIRA. الوسائل (RQ) و SD (RQ min / max) معروضة ومعبر عنها بالنسبة لخلايا shCtrl. (C) صور مجهرية متحد البؤر تظهر التوطين النووي لـ HIRA (مضاد HIRA mAb 04-1488 ، ميليبور أخضر) و PML (أحمر) في خلايا shCtrl أو shHIRA (استنساخ F4). كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). (D) الكمي لشدة إشارة HIRA و PML النسبية (Rel.) لكل نانومتر 2 في خلايا shCtrl أو shHIRA (استنساخ F4) (كما هو موضح). ن ≥ 250 خلية من ثلاث تجارب مستقلة على الأقل. المربعات: الخط الأسود للنطاق المئوي من 25 إلى 75: متوسط ​​شدة الإشارة: النطاق المئوي الخامس إلى الخامس والتسعين. يتم التعبير عن القيم بالنسبة إلى شدة إشارة HIRA أو PML لكل تكرار في خلايا shCtrl. *** ص & lt 0.001، ns (غير مهم) مان ويتني يو-اختبار.

S2 التين. لم يتم تجنيد HIRA إلى PML-NBs في خلايا مصابة وهمية أو غير مصابة على محيط لوحة WT HSV-1 النامية.

صور مجهرية (كنفوكل) تمثيلية للبيانات الكمية المعروضة في الشكل 2 ج. صور مجال واسع تُظهر التوطين النووي لـ HIRA (أحمر) و PML (سماوي) في الخلايا المصابة أو على مقربة من حافة لوحة WT HSV-1 النامية (eYFP.ICP4 ، أخضر). كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). يبرز القناع المقطوع (الأصفر) مناطق الترابط بين HIRA و PML. يتم عرض معاملات التلوين المرجحة. تبرز الأسهم الحمراء الخلايا الإيجابية لـ eYFP.ICP4.

S3 التين. يتم تجنيد HIRA إلى PML-NBs في الخلايا المصابة غير المنتجة على محيط لوحة HSV-1 متحولة خالية من ICP0.

صور مجهرية متحد البؤر انقسام القناة للبيانات المعروضة في الشكل 2A. صور واسعة المجال تُظهر التوطين النووي لـ HIRA (أحمر) و PML (سماوي) في خلايا على مقربة من حافة لوحة HSV-1 متحولة خالية من ICP0 (eYFP.ICP4 ، أخضر). كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). تبرز الأسهم الحمراء والبيضاء أمثلة تمثيلية للخلايا السلبية الإيجابية لـ eYFP.ICP4 ، على التوالي.

S4 Fig. إن تجنيد HIRA إلى PML-NBs في الخلايا الموجودة في محيط لويحات ΔICP0 HSV-1 النامية يعتمد على JAK.

الصور المجهري التمثيلي البؤري للبيانات الكمية المعروضة في الشكل 2 د. صور واسعة المجال تُظهر التوطين النووي لـ HIRA (أحمر) و PML (سماوي) في الخلايا على مقربة من حافة لوحة ICP0 HSV-1 النامية (eYFP.ICP4 ، أخضر) في وجود Ruxolitinib (Ruxo.5 ميكرومتر ) أو DMSO (التحكم في الناقل). كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). يبرز القناع المقطوع (الأصفر) مناطق الترابط بين HIRA و PML. يتم عرض معاملات التلوين المرجحة. تبرز الأسهم الحمراء والبيضاء أمثلة تمثيلية للخلايا الإيجابية والسلبية لـ eYFP.ICP4 ، على التوالي.

S5 التين. توطين HIRA المستحث بـ IFN-في PML-NBs يعتمد على نوع الخلية.

صور مجهرية (كنفوكل) تمثيلية للبيانات الكمية المعروضة في الشكل 3G. تم علاج الخلايا الأولية (MRC5 ، HFs ، IMR-90) ، أو الخلود (MRC5t ، HFt ، RPE ، HaCat) ، أو الورم السرطاني (U2OS ، SAOS ، هيلا ، A549) (A) وهمية أو (B) تم تحفيزها باستخدام IFN-β ( 100 وحدة دولية / مل) لمدة 24 ساعة (كما هو محدد). تم إصلاح الخلايا أحادية الطبقة ونفاذها وتم الكشف عن التوطين النووي لـ HIRA (الأخضر) و PML (الأحمر) عن طريق التألق المناعي غير المباشر. كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). يبرز القناع المقطوع (الأصفر) مناطق الترابط بين HIRA و PML. معاملات التلوين الموزونة معروضة.

شكل S6. تثبيط GSK-3α / يحفز تكاثر الخلايا بعد التحرر من توقف دورة الخلية.

تم زرع خلايا HFt في 48 طبقًا جيدًا وحضنت في وسط يحتوي على مصل منخفض (1 ٪ FBS) لمدة 24 ساعة للحث على توقف دورة الخلية. تم إطلاق الخلايا من الجوع إلى وسط يحتوي على مصل مرتفع (10 ٪ FBS) ، 1 ميكرومتر EdC ، وإما DMSO (التحكم في الناقل) أو مثبط GSK-3α / (50 إلى 5000 نانومتر ، كما هو موضح GSKi ، CHIR-99021 HCl). تم إصلاح الخلايا ونفاذها عند 16 أو 24 ساعة بعد الإصدار (كما هو موضح) وعدد النوى الإيجابية لـ EdC (الخلايا المتكاثرة) التي تم تصنيفها باستخدام كيمياء النقر قبل التحديد الكمي باستخدام مقياس سيليجو للتصوير الخلوي (علوم Nexcelom الحيوية). ن = 3 ، الوسائل و SD المعروضة. ns (غير مهم) ** ص & lt 0.01 ، *** ص & lt 0.001 ، **** ص & lt 0.0001 ANOVA أحادي الاتجاه (Dunnett’s).

S7 التين. توطين HIRA المستحث بـ IFN-في PML-NBs يعتمد على Sp100.

(أ ، ب) الصور المجهري التمثيلي متحد البؤر للبيانات الكمية المعروضة في الشكل 4 د. تم نقل خلايا HFt بشكل ثابت للتعبير عن التحكم غير المستهدف (shCtrl) أو استهداف sp100 (shRNAs). تم معالجة الخلايا أو تحفيزها باستخدام IFN-(100 وحدة دولية / مل) لمدة 24 ساعة (كما هو محدد). تم إصلاح الخلايا أحادية الطبقة ونفاذها وتم الكشف عن التوطين النووي لـ HIRA (الأخضر) و Sp100 (الأحمر) عن طريق التألق المناعي غير المباشر. كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). يبرز القناع المقطوع (الأصفر) مناطق الترابط بين HIRA و Sp100. معاملات التلوين الموزونة معروضة. يظهر الشكل الداخلي منطقة الاهتمام المكبرة (المربعات المتقطعة). (C) تم علاج خلايا HFt أم لا باستخدام IFN-(100 وحدة دولية / مل) لمدة 24 ساعة. تم جمع ليسات الخلية الكاملة (WCL) ومعايرتها بكميات من خلال تحليل اللطخة الغربية لمراقبة مستويات التعبير HIRA. يظهر الأكتين كعنصر تحكم التحميل. (D) تم علاج خلايا HFt بـ IFN-(100 وحدة دولية / مل) لمدة 24 ساعة قبل الترسيب المناعي (IP) باستخدام مضاد مضاد IgG أو Sp100. تم تحليل المواد المثبطة للمناعة بواسطة لطخة غربية لوجود Sp100 و HIRA. يتم تمييز علامات الكتلة الجزيئية.

S8 Fig. يؤثر استنفاد HIRA بشكل طفيف على تعبير ISG بعد تحفيز IFN-.

تم نقل خلايا HFt بشكل ثابت للتعبير عن التحكم غير المستهدف (shCtrl) أو shRNAs الموجهة HIRA (shHIRA). عولجت الخلايا بـ IFN-(100 وحدة دولية / مل) لمدة 9 أو 17 ساعة (كما هو محدد). (أ) تقدير كمية qRT-PCR ام اكس 1, ISG54, ISG15، و OAS1 تحفز مستويات الرنا المرسال في خلايا الشيرا IFN-. n = 3 ، الوسائل و SD الموضحة والمُعبر عنها بالنسبة إلى shCtrl + IFN-β عند 9 أو 17 ساعة (1 خط منقط). ** ص & lt 0.01 *** ص & lt 0.001، ns (غير مهم) اختبار t ثنائي الذيل. (ب) تحليل اللطخة الغربية لمستويات التعبير عن ISGs (Mx1 ، ISG54 ، ISG15) والأكتين (كعنصر تحكم في التحميل) من خلايا shCtrl أو shHIRA المحفزة باستخدام IFN-لمدة 17 ساعة. (ج) الكمي لمستويات تعبير ISG في خلايا shHIRA (كما هو موضح في B). تم تطبيع القيم لعناصر تحكم تحميل الأكتين الخاصة بها ويتم التعبير عنها بالنسبة لخلايا shCtrl المحفزة IFN-إما في 9 أو 17 ساعة (خط واحد منقط). ن ≥ 3 ، يعني و SD المبين. * ص & lt 0.05، ns (غير مهم) اختبار t ثنائي الذيل.

S9 الشكل. ICP0 يعطل توطين HIRA لإدخال vDNA أو الوليدة.

كانت خلايا HFt مصابة أو مصابة بـ 3 PFU / خلية من المسمى مسبقًا (HSV-1 EdC أو ΔICP0 EdC) أو المسمى بالنبض (0.5 ميكرومتر EdC عند التراكب) WT أو ΔICP0 HSV-1 في وجود 50 ميكرومتر من acycloguanasine (ACG لتمكين تصور المدخلات الجينوم الفيروسي EdC المسمى مسبقًا بعد بداية تكرار vDNA ، [64]). تم إصلاح الخلايا ونفاذها عند 6 نقاط في البوصة (بعد إضافة الفيروس). الإصابة (المصنفة مسبقًا) أو من جديد تم اكتشاف vDNA المركب (المسمى بالنبض) عن طريق النقر فوق الكيمياء [9]. تم الكشف عن HIRA و PML عن طريق التألق المناعي غير المباشر. (أ) التوطين النووي الفرعي لـ HIRA (أخضر) و PML (سماوي) فيما يتعلق بإصابة HSV-1 EdC أو ΔICP0 EdC vDNA (أسهم حمراء وبيضاء) بسرعة 6 نقاط في البوصة. (ب) التوطين الخلوي الفرعي لـ HIRA (الأخضر) و PML (السماوي) في مجمعات النسخ المتماثل HSV-1 أو ΔICP0 vDNA (الأسهم الحمراء والبيضاء) بسرعة 6 نقطة في البوصة. تُظهر العناصر الداخلية مناطق الاهتمام المكبرة (المربعات المتقطعة). يسلط القناع المقطوع (الأصفر) الضوء على مناطق الترابط بين البروتينات الخلوية ذات الأهمية و vDNA (كما هو موضح). معاملات التلوين الموزونة معروضة. كانت النوى ملطخة بـ DAPI (أزرق). (C) الكمي من HIRA و PML colocalization إلى من جديد تكرار vDNA أو بين البروتينات ذات الأهمية (كما هو موضح في B) ، كما هو موضح. المربعات: من 25 إلى 75 الخط الأسود للنطاق المئوي: متوسط ​​شعيرات معامل التلوين الموزون (w.): الخط المتقطع من 5 إلى 95 من النطاق المئوي: عتبة التطابق (معاملات التلوين الموزونة & lt 0.2). n 40 نواة لكل عينة مستمدة من ثلاث إصابات مستقلة على الأقل. *** ص & lt 0.001 مان ويتني يو-اختبار. (D) كانت خلايا shCtrl أو shHIRA مصابة أو مصابة بـ 2 PFU / خلية من WT أو ΔICP0 HSV-1 ، كما هو محدد. تم جمع محللات الخلية الكاملة في الأوقات المحددة (hpi) لتحليل اللطخة الغربية لمراقبة مستويات تعبير HIRA وتراكم المنتجات الجينية الفيروسية الفورية المبكرة (ICP0 ، ICP4) ، المبكرة (UL42) ، والمتأخرة (VP5). يظهر الأكتين كعنصر تحكم التحميل. يتم تمييز علامات الكتلة الجزيئية (Mkr). (هـ) تقدير مستويات التعبير النسبي لـ UL42 و VP5 عند 8 نقطة في البوصة في خلايا shHIRA. تم تطبيع القيم لعناصر تحكم تحميل الأكتين الخاصة بها ويتم التعبير عنها بالنسبة إلى shCtrl عند 8 نقطة في البوصة (خط واحد منقط). ن = 3 ، الوسائل و SD المعروضة.

جدول S1. تحليل مسار خلايا HFt shCtrl المصابة بـ IFN-β أو HSV-1 المصابة.

Reactome (https://reactome.org/) تحليل مسار تغييرات النسخ عالية الثقة (FDR Q-value ≤ 0.0001 ، ≥ log2 fold change) التي تم تحديدها بعد IFN-β (IFNb 100 IU / ml) أو HSV-1 (WT أو ΔICP0 HSV-1 ، WT المشروح و dICP0 HSV-1 MOI 1 PFU / cell) لخلايا HFt shCtrl. shCtrl (العلاج t) / shCtrl (بدون معالجة nt).

الجدول S2. تحليل مسار خلايا HFt shCtrl و shHIRA غير المعالجة.

Reactome (https://reactome.org/) تحليل مسار تغييرات النسخ عالية الثقة (قيمة FDR Q ≤ 0.0001 ، ≥ تغيير أضعاف السجل 2) المحددة بين خلايا HFt shCtrl و shHIRA غير المعالجة (بدون علاج nt). shHIRA (NT) / shCtrl (NT).

جدول S3. تحليل مسار IFN-المحفز أو HSV-1 المصابة بـ HFt shCtrl وخلايا shHIRA.

Reactome (https://reactome.org/) تحليل مسار تغييرات النسخ عالية الثقة (FDR Q-value ≤ 0.0001 ، ≥ log2 fold change) التي تم تحديدها بعد IFN-β (IFNb 100 IU / ml) أو HSV-1 (WT أو ΔICP0 HSV-1 ، WT المشروح و dICP0 HSV-1 MOI 1 PFU / cell) لخلايا HFt shHIRA. shHIRA (t) / shCtrl (nt).

جدول S4. Pathway analysis of IFN-β stimulated or HSV-1 infected HFt shCtrl and shHIRA cells.

Reactome (https://reactome.org/) pathway analysis of high confidence transcriptome changes (FDR Q-value ≤ 0.0001, ≥ log2 fold change) identified following IFN-β (IFNb 100 IU/ml) or HSV-1 (WT or ΔICP0 HSV-1, annotated WT and dICP0 HSV-1 MOI 1 PFU/cell) treatment of HFt shHIRA and shCtrl cells. shHIRA (t)/shCtrl (t).

S5 Table. Differentially downregulated immune genes between IFN-β stimulated or HSV-1 infected HFt shCtrl and shHIRA cells.

Differential downregulated immune system genes identified by Reactome (https://reactome.org/) pathway analysis of treated (t) HFt shCtrl and shHIRA cells (as described in S4 Table). shHIRA (t)/shCtrl (t).

S6 Table. Relative fold ISG transcriptome changes in HFt shCtrl and shHIRA cells following IFN-β stimulation or HSV-1 infection.

Relative fold ISG transcriptome [84] changes (FDR Q-value < 0.05) identified following IFN-β (IFNb 100 IU/ml) or HSV-1 infection (WT or ΔICP0 HSV-1, annotated WT HSV1 and dICP0 HSV-1 MOI 1 PFU/cell) treatment. Conditions: shHIRA (no treatment nt)/shCtrl (nt). shCtrl (treatment t)/ shCtrl (nt). shHIRA (t)/shCtrl (t).

S7 Table. HIRA ChIP-seq alignment statistic and ISG enrichment analysis.

Mapped input control and HIRA ChIP-seq reads in untreated (neg.) or IFN-β treated (2000 IU/ml Pos.) IMR-90 shCtrl and shPML cells (as indicated). Relative HIRA enrichment levels on 49 similarly sized interferon stimulated or non-interferon stimulated coding genes in mock (no treatment, [nt]) or IFN-β treated (IFNb 2000 IU/ml) cells (as indicated).


Download and print this article for your personal scholarly, research, and educational use.

Buy a single issue of علم for just $15 USD.

علم

Vol 371, Issue 6533
05 March 2021

Article Tools

Please log in to add an alert for this article.

By Emily Han-Chung Hsiue , Katharine M. Wright , Jacqueline Douglass , Michael S. Hwang , Brian J. Mog , Alexander H. Pearlman , Suman Paul , Sarah R. DiNapoli , Maximilian F. Konig , Qing Wang , Annika Schaefer , Michelle S. Miller , Andrew D. Skora , P. Aitana Azurmendi , Michael B. Murphy , Qiang Liu , Evangeline Watson , Yana Li , Drew M. Pardoll , Chetan Bettegowda , Nickolas Papadopoulos , Kenneth W. Kinzler , Bert Vogelstein , Sandra B. Gabelli , Shibin Zhou

An antibody-based immunotherapeutic agent targets a common TP53 cancer-driving mutation.


شاهد الفيديو: الجهاز المناعي 1:خطوط الدفاع (ديسمبر 2022).